目で見るRFPタンパク質フォールディング実験
【RFPの変性実験】
GFP実験に続いてRFP(赤色蛍光タンパク質)の変性とフォールディングを見てみましょう。 まず塩酸でpHを酸性にします。
【RFPのフォールディング実験】
酸性にして変性させて無色になったRFP溶液に緩衝液を加えてフォールディングさせてみます。 GFPのときは元と同じように緑になりましたね。 さて、RFPではどうでしょうか?
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赤い色が全然戻りません。代わりに白く濁ったのがわかると思います(青っぽいのは蛍光ではなく照明に使ったブラックライトのためです)。
これはフォールディングに失敗して変性したRFP同士が会合して凝集体になってしまったようすを示しています。 GFP実験ではフォールディングは自発的に進みましたが、いつもそうなるとは限らないのです。そこで凝集を防いでフォールディングを助ける必要があります。シャペロンの出番です。